Билирубиновый порошок CAS 635-65-4в основном экстрагируется из желчи. Билирубин нерастворим в воде, растворим в органических растворителях, таких как бензол, хлороформ и сероуглерод, и мало растворим в этаноле и эфире. Билирубин также можно растворить в горячей смеси этанола и хлороформа. Натриевая соль билирубина легко растворима в воде, а ее соли кальция, магния и бария нерастворимы в воде. Билирубин представляет собой моноклинный кристалл светло-оранжевого или темно-красновато-коричневого цвета. Его сухое твердое вещество относительно стабильно, а раствор хлороформа также относительно стабилен в темноте. Он нестабилен в щелочном растворе (например, 0,1 ммоль/л гидроксида натрия) или при контакте с ионами трехвалентного железа и быстро окисляется до биливердина. Билирубин может связываться с глицином, аланином или гистидином. Добавление сывороточного белка, витаминов или ЭДТА может стабилизировать билирубин.
1. Получение соли кальция методом непрямой экстракции соли кальция: добавьте 3-3,5 раза супернатанта насыщенной известковой воды в свежую желчь свиньи при перемешивании, а затем продолжайте перемешивать в течение 5-10мин, Ph{ {4}}, снять пену при нагревании до 50 градусов марлей, продолжить нагревание до кипения, выдержать 2 мин, остудить, профильтровать и получить кальциевую соль. Приготовление готового билирубинового продукта: возьмите кальциевую соль и добавьте 0,8-кратное количество воды, чтобы получилась паста, просейте через сетку 30-40, добавьте к фильтрату 0,3% антиоксиданта, добавьте соль и кислоту. чтобы довести pH до 1,5, дайте постоять 4 часа, профильтруйте, добавьте в осадок на фильтре 8-10 раз больше 80% этанола, раздавите и хорошо перемешайте, добавьте антиоксидант, оставьте на ночь и получите осадок. Добавьте 4-6 раз больше 80 % или более этанола и антиоксиданта, перемешайте и оставьте на ночь. Повторите этот процесс 3-4 раз и высушите осадок при температуре ниже 70 градусов, чтобы получить готовый билирубиновый продукт.
Осаждение солей кальция [HCl, тяжелый сульфит натрия] → осаждение [этанол, тяжелый сульфит натрия] → осаждение [70 градусов] → билирубиновый продукт.
2.Приготовление билирубината кальция методом хлороформной экстракции: Свежую свиную желчь доводят до рН 12 с помощью гидроксида натрия, нагревают до кипения, добавляют раствор хлорида кальция, затем нагревают до кипения, охлаждают, фильтруют с получением билирубината кальция. Свиная желчь [NaOH, CaCl2] → [pH 12, 100 градусов] Приготовление порошка билирубина CAS 635-65-4 кальциевая соль Готовый продукт билирубина: кальциевая соль билирубина доводится до pH 1-2 с помощью соляной кислоты 1:1, кислую воду сливают, хлороформ экстрагируют хлороформом, промывают безводным этанолом и раствор оставляют при температуре около 5 градусов с получением готового билирубинового продукта.
Кальциевая соль билирубина [HCl] → [pH1-2] кислотное соединение [хлороформ, безводный этанол] → [5 степень] билирубин готовый продукт
3. Усовершенствованный метод подкисления с помощью кальциевых солей: возьмите свежую свиную желчь и добавьте 1% гидроксида кальция, хорошо перемешайте, быстро нагрейте до 90-97 градусов, держите в тепле 10 минуты и профильтруйте, чтобы получить кальциевая соль. Нагрев до 40 градусов приведет к появлению жира, который можно аккуратно удалить. Полученную соль кальция можно один раз промыть горячей водой для удаления излишков щелочи и других примесей. Возьмите кальциевую соль и добавьте в 10 раз больше воды, чтобы ее равномерно распределить. Добавьте 1% антиоксиданта и перемешайте (60 об/мин), чтобы по каплям добавить соляную кислоту 1:2. В течение 40 минут доведите pH до 2,0 и подождите, пока pH не останется неизменным, чтобы получить кислое вещество. Свиная желчь [1% гидроксида кальция] → [90-97 степень, 15 мин] Желчная кальциевая соль [антиоксидант, соляная кислота] → [pH2,40 мин] Кислотно-спиртовая промывка, промывка водой: Подкисленный билирубин диспергируется равномерно при комнатной температуре. при 10-кратном количестве этанола рН не должен быть выше 5, добавляют 0,5% антиоксиданта, перемешивают и оставляют примерно на 1 час для наслаивания. Перейдите к верхнему слою спиртового раствора и соберите выпавший билирубин. Промойте билирубин теплой водой с температурой 50 градусов в течение примерно 5 минут, соберите плавающий билирубин, быстро добавьте этанол для обезвоживания и удалите этанол, чтобы получить сырой билирубин. Кислотное соединение [этанол] → [1 час] осадок билирубина [горячая вода на 50 градусов] → [этанол] экстракция сырого билирубина, выпаривание, кристаллизация и сушка: возьмите сырой билирубин и добавьте 10 раз хлороформ и встряхивайте при температуре 50 градусов в течение 10 минут. При необходимости экстрагируйте 2-3 раз, остаток должен быть белым. Хлороформовый экстракт подвергали вакуумной перегонке почти досуха, что приводило к образованию большей части кристаллов билирубина. После охлаждения до комнатной температуры добавляли этанол и дополнительно охлаждали до 4 градусов в течение 10 минут. Кристаллы билирубина фильтровали и обрабатывали безводным этанолом или эфиром с последующей сушкой в вакууме для получения билирубина высокого качества.
Сырой билирубин [хлороформ] → [10 мин] раствор хлороформа [кристаллизация] → высококачественный билирубин
4. Приготовление гидролизного раствора методом экстракции ионообменной смолой: возьмите свежую коровью желчь, отфильтруйте ее через марлю, добавьте 2 моль/л раствор гидроксида натрия для доведения pH до 10 при перемешивании, кипятите и фильтруйте для получения гидролизата.
Адсорбция и элюирование желчной кислоты с помощью колонки со смолой гидролизного раствора: Налейте кипяченый раствор гидролиза в предварительно нагретую колонку со смолой до тех пор, пока цвет стоков не станет темнее и адсорбция не станет насыщенной.
Добавляйте холодную воду до тех пор, пока температура внутри колонки не упадет до комнатной температуры, а затем добавьте разбавленный раствор гидрохлорида бисульфита натрия из верхней части колонны, чтобы pH выходящего потока стал равен 1.
Промывают 75% этанолом, собирают, когда элюент представляет собой темно-зеленый мутный раствор, и промывают до тех пор, пока сточные воды не станут прозрачными, а pH не станет близким к нейтральному. Снова промыть 95% этанолом.
Соберите элюирующий раствор этанола для приготовления желчной кислоты. Гидролизный раствор [ионообменная колонка] → [75% этанол, 95% этанол] Этаноловый элюент для элюирования, концентрирования и сушки билирубина: выпустите весь 95% этанол из колонки, выдержите в хлороформе в течение 10 минут и собирайте хлороформовый элюент до тех пор, пока не исчезнет появляется желтый цвет.
Отогните элюент хлороформа почти досуха, добавьте безводный этанол и продолжайте восстанавливать до тех пор, пока хлороформ не исчезнет. В горячем виде фильтруют, собирают билирубин, высушивают и получают готовый билирубиновый продукт.
Иоланда
Мобильный: +86 -29-86107037-8012
Электронная почта:sales9@konochemical.com
Тел/Вечат: 18729555803